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我司解析：讓細(xì)胞活潑的訣竅你了解嗎?
發(fā)布時(shí)間： 2020-08-05 點(diǎn)擊次數(shù)： 1730次1. 保證所有試驗(yàn)室材料都無菌
穿插污染是細(xì)胞培育的大敵。即使是細(xì)微的污染，也可能毀了幾個(gè)星期的成果。因培育箱內(nèi)溫暖潮濕，真菌極易成長(zhǎng)，因而有必要注意定時(shí)清潔。此外，在將培育瓶、移液管及其他的相關(guān)物品放入超凈臺(tái)之前，應(yīng)用酒精擦拭干凈，以防止污染。
2. 當(dāng)心處理您的培育物
細(xì)胞培育的脆弱性怎樣著重也不為過。劇烈搖晃，或連續(xù)的溫度動(dòng)搖可能會(huì)對(duì)成長(zhǎng)產(chǎn)生不利的影響。保證培育箱是水平的，溫度均一，且遠(yuǎn)離電動(dòng)儀器。此外，盡量防止一次處理多個(gè)細(xì)胞系，由于它可能會(huì)影響細(xì)胞的基因型和表型。您還應(yīng)定時(shí)完結(jié)STR圖譜剖析，以確認(rèn)細(xì)胞系的身份。
3. 在運(yùn)用前正確凍結(jié)細(xì)胞
雖然凍結(jié)看起來是個(gè)簡(jiǎn)單的步驟，但有必要操作妥當(dāng)，以免傷害細(xì)胞。長(zhǎng)期暴露在高溫條件下會(huì)使細(xì)胞無法鋪板。因而，凍存管應(yīng)當(dāng)在37°C水浴中放置2分鐘，然后用條件培育基稀釋，以防止DMSO造成直接傷害。
4. 運(yùn)用對(duì)數(shù)成長(zhǎng)期的細(xì)胞
細(xì)胞培育進(jìn)程共有3個(gè)階段：停滯期、對(duì)數(shù)期和渠道期，別離代表了低細(xì)胞成長(zhǎng)、高細(xì)胞成長(zhǎng)和無細(xì)胞成長(zhǎng)。活力的細(xì)胞是健康的，快速割裂的，在對(duì)數(shù)期以70-80%的集合度存在。
5. 在傳代之前不要讓細(xì)胞*集合
集合度是指貼壁細(xì)胞占有培育瓶表面積的份額。*集合意味著100%的表面都被貼壁細(xì)胞覆蓋。一定要防止這種狀況，由于它意味著細(xì)胞不能持續(xù)成長(zhǎng)。不過，燃眉之急是運(yùn)用活潑成長(zhǎng)的細(xì)胞。
6. 挑選細(xì)胞的培育基開發(fā)戰(zhàn)略
在細(xì)胞培育進(jìn)程中，培育基是控制產(chǎn)品質(zhì)量、產(chǎn)量和成本的重要因素。有必要針對(duì)每種培育物來定制培育基，以優(yōu)化試驗(yàn)結(jié)果。在決定以哪種方法來開發(fā)您的培育基時(shí)，您有幾個(gè)挑選。