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上海研域跟您淺談ELISA實驗中的基質(zhì)效應(yīng)與過錯
發(fā)布時間： 2022-08-23 點擊次數(shù)： 1691次當(dāng)ELISA實驗中的樣本值較低挨近試劑盒的靈敏度時，就容易發(fā)生樣本值低于空白值的現(xiàn)象，特別是在血清和血漿樣本的查看。ELISA實驗專家對此現(xiàn)象的要素分析有兩個方面，一是基質(zhì)效應(yīng)、二是實驗過錯 。
一、基質(zhì)效應(yīng)
分析中，基質(zhì)指的是樣本中被分析物以外的組分，基質(zhì)常常對分析物的分析進(jìn)程有顯著的煩擾，并影響分析成果的準(zhǔn)確性，這些影響和煩擾被稱為基質(zhì)效應(yīng)。
仿照物與被測樣本在蛋白豐度、復(fù)雜性、pH等要素都會存在差異。當(dāng)單個樣本或少量樣本值低于空白值時，可能是過錯要素，這時應(yīng)增加重復(fù)，進(jìn)步操作技術(shù)。當(dāng)許多樣本都低于空白值時，應(yīng)思考基質(zhì)效應(yīng)的影響，建立校正曲線予以修改。
ELISA試劑盒在開發(fā)進(jìn)程中，標(biāo)準(zhǔn)品不能選用人或動物血清、血漿作為標(biāo)準(zhǔn)曲線的稀釋液，只能選用其仿照物。當(dāng)樣本的基質(zhì)與其仿照物對比，下降抗原抗體的聯(lián)絡(luò)，便產(chǎn)生了樣本值低于空白值的現(xiàn)象。構(gòu)成樣本值無法計算出數(shù)值，或許數(shù)值為負(fù)。
如今比較常用的去掉基質(zhì)效應(yīng)的方法是，經(jīng)過已知分析物濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品，一同盡可能堅持樣本中的基質(zhì)不變，建立一個校正曲線。
二、實驗過錯
過錯分為三類，體系過錯、隨機(jī)過錯和過錯過錯。這三類過錯中，體系過錯對樣本值和空白值之間的差異無影響。
ELISA實驗中的樣本值低于空白值在過錯方面首要來源于隨機(jī)過錯和過錯過錯。
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