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    免費待測人17-酮類固醇ELISA檢測試劑盒

    發布時間: 2012-09-03  點擊次數: 1443次

    人17-酮類固醇ELISA檢測試劑盒            

    本試劑僅供研究使用  標本:體液

    試驗原理:
        17-KS試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知17-KS濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將17-KS和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中17-KS的濃度呈比例關系。

    自備材料
    蒸餾水。
    加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
    振蕩器及磁力攪拌器等。

    安全性
    避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
    實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
    不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

    人17-酮類固醇ELISA檢測試劑盒 

    操作注意事項
    試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
    實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
    不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
    使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
    使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
    洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
    底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
    加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
    按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

    樣品收集、處理及保存方法
    血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
    血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
    細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
    組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
    保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

    人17-酮類固醇ELISA檢測試劑盒 

    操作步驟
    使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
    根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
    加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
    甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
    每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
    甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
    每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
    取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
    在450nm波長處測定各孔的OD值。

    6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

    試劑盒性能
    1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
    2. 特異性:不與人其它細胞因子反應。
    3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

    人17-酮類固醇ELISA檢測試劑盒 

    結 果 判 斷 與 分 析
    1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

    2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的17-KS標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的17-KS含量可根據其OD值由標準曲線換算出濃度。

    3、檢測值范圍:0-80umol/L

    4、敏感度: 0.1 umol/L

    ER-α(Estrpgen Receptor alpha) 雌激素受體α抗體 0.1ml
    ER-α(Estrpgen Receptor alpha) 雌激素受體α抗體 0.2ml
    ER-α/β Estrpgen Receptor α/β 雌激素受體α/β抗體 0.1ml
    Phospho-FAK (Tyr407)  磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
    phospho-FAK (Tyr577)  磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
    phospho-FAK (Ser732)  磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml
    ER-α/β Estrpgen Receptor α/β 雌激素受體α/β抗體 0.2ml
    ER-β (Estrogen receptor-β) 雌激素受體β 抗體 0.2ml
    ER-β (Estrogen receptor-β) 雌激素受體β抗體 0.2ml
    ESA/EPCAM (Epithelial specific antigen) 上皮特異性抗原抗體 0.1ml
    ESA/EPCAM (Epithelial specific antigen) 上皮特異性抗原抗體 0.2ml
    ET-1/PPET1(Endothelin-1) 內皮素-1抗體 0.1ml
    ET-1/PPET1(Endothelin-1) 內皮素-2抗體 0.2ml
    Ets1/ETS-1 Ets轉錄因子家族ets1抗體 0.2ml
    Eukaryotic aspartyl protease(Rice) 天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗體(水稻蛋白的一種) 0.2ml
    phospho-Bim(Ser55)  磷酸化細胞死亡調解子抗體 0.1ml
    phospho-Bim(Ser69)  磷酸化細胞死亡調解子抗體 0.1ml
    Phospho-BLNK(Tyr96)  磷酸化T淋巴細胞連接蛋白抗體 0.1ml
    phospho-A Raf (Ser214)  磷酸化A-Raf抗體 0.1ml
    Phospho-A Raf (Ser299)  磷酸化A-Raf抗體 0.1ml
    EV71(Human enterovirus 71)VP1 腸道病毒71型/手足口病病毒抗體 0.1ml
    EV71(Human enterovirus 71)VP1 腸道病毒71型/手足口病病毒抗體 0.2ml
    EV71(Human enterovirus 71; VP1)(CT) 腸道病毒71型/手足口病病毒抗體(C端) 0.2ml
    EXPB-2(beta-expansin)death inducer-obliterator-2 inducer-obliterator-2 植物延展素-β 0.2ml
    Ezrin/Radixin 埃茲蛋白抗體 0.2ml
    F1 operon positive regulatory protein(NT) 鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(N端) 0.2ml
    F1 operon positive regulatory protein(CT) 鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(C端) 0.2ml
    phospho-B-Raf (Ser365)  磷酸化B-Raf抗體 0.1ml
    phospho-B-Raf (Ser445)  磷酸化B-Raf抗體 0.1ml
    phospho-B-Raf (Ser601)  磷酸化B-Raf抗體 0.1ml
    Phospho-BAP1 (Ser592)  磷酸化乳腺癌易感基因1抗體(人) 0.1ml
    Fabp2 (fatty acid binding protein 2, intestinal) 脂肪酸結合蛋白2抗體 0.2ml
    FABP(brain) (Fatty acid-binding protein brain)CT 腦型脂肪酸結合蛋白抗體(C端) 0.2ml
    FABPB (Fatty acid-binding protein brain) 腦型脂肪酸結合蛋白抗體 0.2ml
    factor V(Vcoagulation factor) 凝血因子5抗體 0.2ml
    factor VIII(FVIII) 第八因子相關抗原抗體 0.1ml
    Phospho-Btk(Ser180)  磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗體 0.1ml
    Phospho-Btk(Tyr223)  磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗體 0.1ml
    Phospho-Troponin I (Ser23/24)  磷酸化鈣調節蛋白-1抗體 0.1ml
    phospho-CaMK2 alpha (Thr286)  磷酸化鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α抗體 0.1ml
    Phospho-Cas (Tyr165)  磷酸化細胞凋亡敏感性基因 0.1ml
    factor VIII(FVIII) 第八因子相關抗原抗體 0.2ml
    factor ⅩⅢ(coagulation factor ⅩⅢ) 凝血因子13抗體 0.2ml
    FADD/DAXX (Fas-associated protein with death domain) Fas死亡結構域相關蛋白 0.2ml
    phospho-FADD(pSer194) 抗磷酸化Fas死亡結構域相關蛋白抗體 0.2ml
    FAK(Focal adhesin kinase) 粘著斑激酶抗體 0.1ml
    Phospho-Caspase-9 (Try153)  磷酸化半胱氨酸蛋白酶9抗體 0.1ml
    Phospho-Caveolin-1 (Tyr14)  磷酸化細胞質膜微囊蛋白-1抗體 0.1ml
    phospho-Beta-catenin(Tyr142)  磷酸化β 連環素蛋白抗體 0.1ml
    Phospho-Beta-Catenin (Ser33/37)  磷酸化β 連環素蛋白抗體 0.1ml
    Phospho-Beta-Catenin (Ser45)  磷酸化β 連環素蛋白抗體 0.1ml
    FAK(Focal adhesin kinase) 粘著斑激酶抗體 0.2ml
    phospho-FAK(pTyr577) 抗磷酸化粘著斑激酶抗體 0.2ml
    FAF1(Fas associated factor 1) Fas相關1因子抗體 0.2ml
    FANCF(Fanconi Anemia Complementation Group F) 范可尼貧血相關蛋白F抗體 0.2ml
    FAM3B/PANDER(PANcreatic DERived factor) 胰腺衍生因子抗體 0.2ml
    phospho-CBL2(Tyr731)  磷酸化原癌蛋白CBL2抗體 0.1ml
     

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