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發(fā)布時(shí)間： 2013-10-16 點(diǎn)擊次數(shù)： 1085次內(nèi)臟利什曼病（VL）是一種死亡率很高的惡性疾病，主要由杜氏利什曼原蟲(chóng)引起。白蛉是VL傳播的主要媒介，而狗是白蛉的主要攜帶者。VL是許多國(guó)家的一種地方性疾病，在大多發(fā)展中國(guó)家中，VL也是一個(gè)嚴(yán)重的問(wèn)題，特別在那些人口集中的城市里。這種疾病在拉丁美洲、東非、中東、印度和中國(guó)都有很高的發(fā)病率。VL也會(huì)傳播到靠近地中海的一些國(guó)家去，如意大利、法國(guó)南部、西班牙、葡萄牙和非洲南部。在歐洲南部，VL已成為AIDS病人中主要的機(jī)會(huì)性傳染病。急性VL的診斷通常是通過(guò)抽吸骨髓來(lái)直接鑒別其寄生蟲(chóng)。這種鑒定方法對(duì)人體有侵襲性，疼痛并且危險(xiǎn)，而且經(jīng)常因不能從組織中分離到寄生蟲(chóng)而使得鑒定的成功率非常小。另外 ELISA試劑盒，在急性疾病階段，抗利什曼原蟲(chóng)抗體的滴度非常高，血清篩查的方法已廣泛被應(yīng)用。ELISA應(yīng)當(dāng)是VL血清學(xué)診斷的實(shí)驗(yàn)方法，盡管免疫熒光抗體檢測(cè)和直接凝集實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的是整個(gè)寄生蟲(chóng)，但它們?nèi)匀槐粡V泛應(yīng)用（ELISA一起用或單獨(dú)用）。
3、 ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
在*次溫育時(shí)，病人血清中的抗體結(jié)合到檢測(cè)孔的抗原上。在第二次溫育時(shí)，酶復(fù)合物可結(jié)合到抗原抗體復(fù)合物上。洗板除去未結(jié)合的酶聯(lián)物，加入顯色劑，有酶聯(lián)物和過(guò)氧化物酶的情況下會(huì)顯示藍(lán)色。之后加入終止液終止酶反應(yīng)，此時(shí)溶液由藍(lán)色變成。
收集樣品后盡快檢測(cè). 如需保存, 凍存樣品,但要避免反復(fù)凍融.檢測(cè)前,將樣品解凍至室溫.
如樣品需稀釋,用EIA緩沖液稀釋
建議樣品,標(biāo)準(zhǔn)品做雙份檢測(cè)
保持樣品處于中性PH范圍.有機(jī)溶劑的污染會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果
ELISA試劑盒只能用本試劑盒提供的洗滌液洗板.不充足的洗板會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果
在吸水紙上拍干去除殘留液滴時(shí),切勿用吸水紙刮擦孔內(nèi)壁
顯示劑應(yīng)避光保存并避免與金屬物質(zhì)接觸
加終止液后,30 min內(nèi)就應(yīng)讀取實(shí)驗(yàn)結(jié)果